Питательная среда с эозин метиленовым синим, сухая.
ХАРАКТЕРИСТИКА
Среда Левина-ГРМ предназначена для выделения и дифференциации энтеробактерий, для выделения коагулазоположительного стафилококка при обследовании декретированных групп.
Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, образуют на среде колонии фиолетового цвета с металлическим блеском. Лактозоотрицательные энтеробактерии образуют прозрачные, бесцветные колонии. Стафилококки образуют на среде Левина -ГРМ мелкие колонии с темным центром.
Представляет собой гигроскопичный мелкодисперсный порошок светло-сиреневого цвета.
СОСТАВ, Г/Л
панкреатический гидролизат рыбной муки
12,0
экстракт пекарных дрожжей
1,0
Д-(+)-лактоза
10,0
натрий гидрофосфат
0,7
натрий хлорид
4,2
эозин-Н
0,4
метиленовый синий
0,065
агар
9,0±2,0
рН готовой среды
7,3±0,2
ПРИГОТОВЛЕНИЕ
Препарат в количестве, указанном на этикетке (37,4±2,0 г), размешивают в 1 л дистиллированной воды, доводят до кипения и кипятят 2-3 мин.
Горячую среду фильтруют через ватно-марлевый фильтр.
Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 112 °С в течение 20 мин.
Стерильную среду охлаждают до температуры 45-50 °С и разливают в стерильные чашки Петри.
После застывания чашки подсушивают при температуре (37±1) °С в течение 40-60 мин.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Тест-штамм
Инокулят
Инкубация
Наблюдаемый эффект
Shigella flexneri 1a 8516
0,1 мл из разведения 10-7
18-20ч 36-38 °С
Наличие бесцветных прозрачных круглых колоний диаметром 1,0-1,5 мм
Escherichia coli 168/59 (0111:K58)
0,1 мл из разведения 10-7
18-20ч 36-38 °С
Наличие круглых темно-фиолетовых колоний с металлическим блеском диаметром 1,5-2,0 мм
Staphylococcus aureus 209-P (ATCC 6538-P)
0,1 мл из разведения 10-5
48ч 36-38 °С
Наличие круглых колоний с темным центром до 1 мм
При посеве смеси тест-штаммов наблюдается четкая дифференциация шигелл от эшерихий, имеющих фиолетовую окраску и металлический блеск.
ПОСЕВ И ИНТЕПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Взятие , посев инфицированного материала и учет результатов проводят в соответствии с "Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями" (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г. N 535 "Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений".
Через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С проводят учет результатов по наличию энтеробактерий. Лактозоотрицательные энтеробактерии на среде Левина-ГРМ образуют прозрачные бесцветные колонии . Лактозоположительные энтеробактерии образуют круглые колонии темно-фиолетового цвета с металлическим блеском.
Через 48 ч инкубации при температуре (37±1) °С проводят учет результатов по наличию роста стафилококка. Коагулазоположительный стафилококк образует на среде Левина-ГРМ круглые колонии диаметром до 1 мм с тёмным центром.
